DHEA 主要依賴于化學合成，合成步驟復 雜，中間產物較多，DHEA 得率和純度不易控制。相 比之下，微生物法反應條件溫和，各種酶促反應可實 現 DHEA 充分游離。采用微生物發法，通過微生 物代謝酶對甾醇側鏈進行專一性酶解，優化了以菜籽 甾醇、谷甾醇等植物甾醇為底物高效制備 DHEA 的工 藝。SHP-250 生化培養 箱、GZX-9240 MBE 電熱鼓風干燥箱：上海精宏試驗設 備有限公司；YM 75 立式壓力蒸汽滅菌器：上海三申醫 療器械公司；SB-5200D 超聲波清洗器：寧波新芝生物 科技股份有限公司。蛋白胨與甘薯生全粉按質量比 4%混合，再按一定 液固比加入去離子水，攪拌混勻后置于 121 ℃下滅菌 15 min 得發酵培養基，按一定體積比于發酵培養基中 接種米曲霉孢子懸浮液，發酵一段時間后高溫滅菌終 止發酵，發酵后培養基冷卻后于 4 000 r/min 下離心 15 min，收集沉淀于 50℃下干燥并粉碎過 60目篩得發 酵產物。

    隨接種量升高，DHEA 得率呈明顯 先上升后下降變化趨勢。當接種量介于 4%~10%之間 時，接種量對以甘薯生全粉為原料米曲酶發酵提取 DHEA 得率有顯著（p<0.05）影響；接種量超過 10%時， 繼續提升接種量，DHEA 得率無顯著變化；接種量為 6%時，DHEA 得率最高，達 61.32 μg/100 g。隨發酵時間延長，DHEA 得率呈顯 著先上升后下降變化趨勢（p<0.05）。發酵 36 h 時，DHEA 得率最低，僅為 12.20 μg/100 g；發酵 72 h 時，DHEA 得 率最高，為 79.34 μg/100 g。研究表明，發酵48 h~72 h 是 米曲霉生長繁殖的高峰期，發酵時間不足，發酵液中菌 絲體絕對數量不高，產酶不足進而影響 DHEA 得率； 發酵時間太長，培養基中營養物質消耗過多，米曲酶生 長減緩甚至衰亡，可水解糖苷鍵等酶的產量降低[20]，導 致培養基中 DHEA 不能充分游離，最終其得率下降。